國防部
英國博士學位進修心得報告探討人體血液中的非編碼核糖核酸之載體組成及心血管疾病下的其影響
基本資料
系統識別號: |
C10801429 |
相關專案: |
無 |
計畫名稱: |
107年度國外民間大學博士班全時進修# |
報告名稱: |
英國博士學位進修心得報告探討人體血液中的非編碼核糖核酸之載體組成及心血管疾病下的其影響 |
電子全文檔: |
C10801429_1.pdf
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附件檔: |
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報告日期: |
112/12/18 |
報告書頁數: |
8 |
計畫主辦機關資訊
計畫主辦機關: |
國防部
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出國期間: |
108/06/28 至 112/12/16 |
姓名 |
服務機關 |
服務單位 |
職稱 |
官職等 |
鄧以柔 |
國防部 |
國防醫學院三軍總醫院 |
陸軍中尉 |
其他 |
報告內容摘要
血液循環中的小分子核糖核酸被認為是有前瞻性的生物標的,可利用於微侵入式抽血檢查。目前有更多研究開始專注在胞外顆粒攜帶的小分子核糖核酸及其對於細胞間信息交通的角色。在其他研究上顯示脂蛋白和Argonaute複合物也可以為攜帶血液循環中小分子核糖核酸之載體,而可信賴之分離方法的缺乏及只專注在分離物的不完整研究導致不同研究設計下的不一致結論,並且誤導了小分子核糖核酸在不同載體複合物的含量。
超速離心是從各種體液中分離胞外顆粒的最常用的方法,而我們利用免疫墨點和質譜儀蛋白體學的初步數據顯示超速離心只能低產率地分離含有脂蛋白的胞外顆粒。當我們只分析分離出的胞外顆粒樣品就會高估胞外顆粒真正的小分子核糖核酸含量。為了改善此議題,我們使用高校液相色譜系統來執行分子排阻層析法,而按照顆粒和複合體在照流體液相下直徑來分離體液。此技術具有減少物質流失和避免顆粒/複合物之聚集的好處。此技術可從人體血清分離出富含胞外顆粒的樣品、富含白蛋白及低密度脂蛋白的樣品及高密度脂蛋白的樣品。在此過程中我們也使用胞外顆粒相關抗體 (syntenin-1 及 CD9)和載脂蛋白相關抗體(apoA1 及 apoB)來分析這些分離的樣品來證明。我們建立的平台可以從人體血清來提取不同富含小分子核糖核酸載體的分離樣品,並使用反轉錄聚合酶連鎖反應來分析小分子核糖核酸在其中的分布。這樣相對含量的分布也能用來跟蛋白質標的來比較出哪種載體與特定的小分子核糖核酸為共同溶析出來的複合體。我們也將會使用成分相對較單純的含細胞分泌物之培養基來減少非特異性的蛋白質之摻雜可能性,並做出針對細胞特異之小分子核糖核酸的分析研究。
這項研究建立起一個能夠更具體分析小分子核糖核酸的載體之特性,且了解血液中的小分子核糖核酸如何被胞外顆粒、脂蛋白和核糖核酸鑲嵌蛋白攜帶著。因此我們可以不只檢測血液中小分子核糖核酸的總體含量,也能去分析在不同載體的小分子核糖核酸分布。這樣的技術不僅能研討出小分子核糖核酸在細胞間信息傳遞的特定作用,並且能開啟另一個疾病檢測生物標的之新領域。
其他資料
前往地區: |
英國; |
參訪機關: |
英國倫敦國王學院心血管研究所 |
出國類別: |
進修 |
關鍵詞: |
非編碼核糖核酸、分子排阻層析法、胞外顆粒、脂蛋白 |
備註: |
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